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Caractérisation complète de Salmonella Anatum SPBM3 issue d’une viande végétale : risques et résistances

Détection, caractérisation génomique et sensibilité aux antibiotiques de la souche Salmonella Anatum SPBM3 isolée d’une viande végétale

Introduction

La popularisation des alternatives végétales à la viande s’accompagne de préoccupations croissantes concernant leur sécurité microbiologique. La présente étude met en lumière la détection, l’identification génomique et l’analyse de la résistance aux antibiotiques d’une souche de Salmonella Anatum SPBM3 isolée à partir d’un substitut de viande d’origine végétale. L’analyse intégrée réalisée permet de comprendre les risques associés à la contamination bactérienne des produits végétaux transformés ainsi que l’importance de la surveillance génétique et phénotypique pour garantir la sécurité alimentaire.

Matériel et méthodes

Échantillonnage et détection microbienne

L’échantillon de substitut de viande végétale suspect a été soumis à des tests de culture sélective, suivis d’un enrichissement et de l’identification biochimique traditionnelle. Les colonies caractéristiques ont été soumises à une PCR spécifique ciblant les gènes invA et stn, confirmant la présence du genre Salmonella.

Confirmation et identification phylogénétique

Le séquençage du gène 16S rRNA a permis l’identification initiale de l’isolat SPBM3, complétée par une analyse comparative avec d’autres séquences référencées dans NCBI. Le score d’identité génétique élevé a confirmé son classement comme Salmonella enterica subsp. enterica sérovar Anatum.

Caractérisation génomique

L’assemblage du génome entier au moyen du séquençage Illumina a abouti à un génome de haute qualité, permettant une annotation complète des gènes codants, des îlots génomiques, et des gènes de résistance. Les analyses de typage multilocus (MLST) ont été conduites pour déterminer la structure phylogénétique précise de la souche.

Test de sensibilité aux antibiotiques

La méthode de diffusion sur disque de Kirby-Bauer a été utilisée sur une gamme de 12 antibiotiques couvrant diverses classes (aminoglycosides, β-lactamines, tétracyclines, quinolones, etc.). Les résultats ont été interprétés conformément aux normes CLSI pour évaluer la sensibilité ou la résistance.

Résultats

Isolation et identification de Salmonella Anatum SPBM3

L’isolat SPBM3 a été détecté dans un lot de simili-carné à base de soja. Après enrichissement, des colonies typiques ont été observées sur milieu XLD et Hektoen, confirmées Salmonella spp. par PCR. Le séquençage du gène 16S rRNA a validé l’appartenance à S. Anatum, sur la base d’une similarité de séquence supérieure à 99%.

Analyse du génome complet

L’assemblage du génome entier démontre la présence d’environs 4,8 Mb, comprenant près de 4500 gènes codants, 85 ARNt et 22 ARNr. Trois îlots génomiques de pathogénicité (SPI-1 à SPI-3) ont été identifiés, associés à la virulence bactérienne et à l’invasion cellulaire. Les gènes invA, ssaR, et sopE étaient présents, renforçant le potentiel pathogène de la souche.

Gènes de résistance aux antibiotiques

Au total, neuf gènes de résistance ont été détectés, incluant notamment blaTEM, aadA1, sul1, tetA et qnrB, indiquant une résistance multidrogue probable. L’analyse bioinformatique a révélé leur distribution sur des éléments mobiles, facilitant la dissémination horizontale.

Profil de sensibilité aux antibiotiques

La souche Salmonella Anatum SPBM3 s’est révélée résistante à l’ampicilline, la tétracycline, la sulfaméthoxazole et la streptomycine, mais est demeurée sensible à la ciprofloxacine, la gentamicine, l’imipénème et la cefotaxime. Ces résultats corroborent le profil génomique identifié.

Discussion

Les résultats mettent en évidence la persistance de Salmonella dans des aliments d’origine végétale pourtant transformés, remettant en question l’innocuité présumée des alternatives à la viande animale. La présence d’îlots de pathogénicité, couplée à la détection de multiples gènes de résistance, indique un risque épidémiologique non négligeable. Les facteurs facilitant la dissémination génétique présentent un défi pour le contrôle de la contamination. Les données soulignent la nécessité de surveillances génomiques renforcées, même dans les filières végétales.

Conclusion

L’isolement de Salmonella Anatum SPBM3 à partir d’un simili-carné végétal met en lumière la capacité des bactéries pathogènes résistantes à coloniser de nouveaux vecteurs alimentaires. Le séquençage génomique complet, combiné au profil de sensibilité aux antibiotiques, s’avère essentiel pour évaluer et maîtriser les risques pour la santé publique. Il est recommandé d’intégrer ce type de diagnostic dans les stratégies HACCP, tout en poursuivant la recherche sur la résistance et la virulence bactériennes dans des matrices végétales.

Source : https://www.mdpi.com/2304-8158/14/21/3710